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精彩案例分析

最近经常看见有老师在谈论嗜血杆菌属，主要涉及流感嗜血杆菌和副流感嗜血杆菌，那如何筛选流感呢？在没有V、X、V/X这三种纸片时，我们通常都采用卫星+普平来进行疑似菌落的筛选。最近我在华西进修时也发现了一个困惑，现在分享给老师们，希望能抛砖引玉，引发老师们的讨论。

筛选平板时分别发现了下面两个痰培养CAH平板（如下图）：

如果单纯从菌落特点看，很难判断是否是流感嗜血杆菌，若没医院都是采用卫星（BAP）+普平（MH）来筛选，我也采用了这个办法，但是结果却让我很意外，为什么呢？上图：

A、B板血平板（SBA）卫星现象都是阳性；

A板普平很显然的阳性（+）连远端都是生长了

而B板仔细看挨着金葡的地方也有少量生长，那是否也为（+）呢？严格意义来说也应该是阳性的呀！难道这两个菌都是只依赖V因子就可以生长的非流感嗜血杆菌吗？

最后我们上了质谱，得出：A为副流感嗜血杆菌，B为流感嗜血杆菌。

那为什么会出现这种现象呢？我们又该怎么处理呢？难道是金葡标准菌株有问题？MH平板有问题？

验证试验如下：我分别用到了如下几种标准菌株：

1.流感嗜血杆菌ATCC（新活化）

2.金葡ATCC,（新活化）无色素

3.金葡ATCC（新活化）

4.平时使用的金葡标准菌株（已传代N代）不知是那种传代的。

试验SBA平板卫星结果如下图：

MH卫星现象如下：

新活化的金葡ATCC普平卫星（-）

平时使用传代N代的金葡标准株，普平（-）

而新活化的ATCC普平上有少量生长，类似于之前的B平板的筛选试验，难道也是（+）吗？

最后通过这次验证时间，得出了结论是啥呢？

结论就是：部分金葡在普平上也会生长（数据量太少，或许没有说服力），请老师们在平时多注意一下。

流感的筛选：

1.根据菌落形态：圆形、湿润、光滑（大部分流感）或粗糙（大部分副流感）、透明或半透明（也呈露滴样）、无色或灰白色的菌落，有荚膜的菌株可呈粘液性菌落。

2.纯培养的嗜血杆菌有“鼠穴味”，是因为色氨酸代谢产生吲哚所致（个人从来没有闻出来过，嘿嘿）

3.涂片很关键（阴性短小杆菌或多形态杆菌）

4.卫星+普平或者用V、X、V+X纸片验证

5.建议以上卫星试验最好都采用配置待测菌株1.0的麦氏浊度，涂布接种来检测。

6.适当是可以使用API-NH卡，当然条件更好的可以用质谱仪。

药敏这块：

1.K-B法：HTM培养基，0.5麦氏浊度，将平板放置5%CO2、35+/-2°。观察采用无反光的黑色背景测量，抑菌圈边缘有微弱的生长，应忽略不计。对于甲氧苄啶和磺胺，纸片周围轻微的生长（少于20%的菌苔）也应忽略不计。（摘自实用临床微生物学检验与图谱）

2.注意产生TEM型β-内酰胺酶的菌株和不产生β-内酰胺酶的氨苄西林耐药菌株的检出。

总结后感：一个看似很常见的细菌，其实有时候也有让我们困惑的地方，当遇到这种情况时，个人感觉我们微生物人一定不能嫌麻烦，仔细负责是我们检验人的守则。结合这个病例，也让小颜深刻的体会到这点。随着检验与临床的沟通越来越紧密，传统意义上的检验人就是化验员的说法，早已不符实际，我们应该主动参与进临床，正如刘洋（医院）老师说的“与其关门臆测，不如一个电话”。大周末的晚上，谢谢老师们参与讨论！晚安！

附带几个老师的讨论：

医院：流感嗜血杆菌在呼吸道算致病菌。但是副流感嗜血杆菌的致病意义不明确，对特定病人（老年，尤其是老慢支，有呼吸道症状，多次培养结果一致。）有意义，药敏常规不用做。流感属于致病菌，不用考虑量的因素，因为是苛养菌，体外量不能反映真实体内菌量。

刘洋医院：可如果其也存在定植情况怎么办？我遇到过检出但无感染症状患者，我们现在流感按致病菌处理，但就不知其定植如何处理。

向丽丽重庆陈医：条件致病，如能确定定植不用处理。儿童定植常见

牵着蜗牛散步：流感嗜血杆菌健康人群总体定植率在10%以上。流感嗜血杆菌分a-f六个血清群，其中b群引起绝大部分病例，所以有条件的地方做个血清，指导意义很大。

刘洋医院：B群如要做在脑部感染更重要

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