万古霉素中介金葡菌VISA可长久存活

作者:陕医院杨致霈

编辑:董宏亮

医院感染的病原体的传播方面起着重要的作用,尽管先前的研究已经表明,耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)可以在室温下干燥的表面存活,但目前对于万古霉素中介金黄色葡萄球菌(VISA)相关研究较少。

为此,巴西的学者做了一项实验:比较甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、万古霉素中介金黄色葡萄球菌(VISA)在不同类型的表面上的存活时间,细胞表面疏水性,非生物表面附着和生物膜形成。

实验采用金黄色葡萄球菌的三个不同菌株:ATCC(MSSA)、ATCC(MRSA)、从正在使用万古霉素治疗心内膜炎的患者血培养分离出的VISA。

表面生存时间

①将胶乳(手套)、%棉织物、PVC地板(指采用聚氯乙烯材料生产的地板,主要原料是天然石粉,耐磨层是PVC材质,因此又名叫“石塑地板”或“石塑地砖”)和福米卡(一种家具塑料贴面,有便宜易清洁等特点)等测试底物按统一规格制作好后进行灭菌处理,无菌操作转移至无菌培养皿。②将含有标准等效的十微升体积各试验微生物的营养肉汤培养加到测试底物表面。③所有接种物干燥之后保存在实验室中45天,每日进行接种培养,在37℃每日观察培养六天,若出现混浊为阳性。

所有样品(MSSA、MRSA、VISA)在PVC地板和福米卡存活时间至少40天,VISA更是存活超过45天。在胶乳表面VISA和MSSA存活一天,MRSA存活两天。在棉织物上,MRSA和MSSA存活18天。

细胞表面的疏水性

试验微生物的细胞表面疏水性是使用烃相互作用的亲和力的方法和1mL二甲苯确定。计算疏水性指数(HI)的公式:HI=(A-B)×/A,其中A是经二甲苯处理前的微生物悬浮液的光密度(OD),B是二甲苯处理后得到的水相的光密度。

所有三种测试的菌株和附加分离测试结果为高度疏水(HI50%)

非生物表面附着力

使用花岗岩,乳胶(手套),玻璃,PVC地板和福米卡进行非生物表面附着力测试。

MSSA附着到乳胶和玻璃;VISA附着到乳胶,PVC基地板和福米卡;MRSA附着到乳胶,玻璃,PVC基板和福米卡。

生物膜的形成

分别在评估37℃下通气培养6,12,24和48小时,在微量滴定板系统中进行浮游细胞的生物膜形成和外径测试。

MRSA是最大生物膜生产者,OD增加可能是检测时间为48小时;VISA24小时形成的生物膜比在6小时形成的生物膜多10倍;MSSA所产生的生物膜最少。

表1MSSA、MRSA、VISA:生存时间(天)、疏水性、在不同污染物的附着

生存时间(天)

污染物

MSSA

MRSA

VISA

乳胶

1

2

1

棉布

18

18

3

PVC地板

45

41

45

福米卡

43

40

45

细胞表面疏水性

隔离/来源

起始OD

最终OD

疏水性指标(%)

MSSA

ATCC

0.

0.05

87.62

Sa

0.

0.

89.83

Sa

0.

0.

91.15

Sa

0.

0.

95.43

Sa

0.

0.

98.55

Sa

0.41

0.

97.32

MRSA

ATCC

0.

0.

87.34

Sa

0.

0.

95.48

Sa

0.

0.05

87.75

Sa

0.

0.

97.85

Sa

0.

0.

90.52

Sa

0.

0.

86.85

VISA

VISA

0.

0.

89.57

Mu50

0.

0.

72.84

Mu3

0.

0.

87.97

0.4

0.01

97.5

SPclone

0.

0.

91.18

SSclone

0.

0.

88.3

非生物表面附着(Day1/2/3)

污染物

MSSA

MRSA

VISA

花岗岩

-/-/-

-/-/-

-/-/-

乳胶

+/-/-

+/+/+

+/+/-

玻璃

+/-/-

+/-/-

-/-/-

PVC地板

-/-/-

-/-/+

+/+/+

福米卡

-/-/-

+/-/+

+/+/+

图在不同的时间生物膜形成(a)和浮游细胞测定(b),绿线为MSSA,红线为MRSA,蓝线为VISA

医院感染某些病原体传播中起重要作用,在本研究中,VISA整个实验期间(45天)在福米卡和PVC地板上都存活,医院环境中生存下来,这可能会导致感染,甚至爆发。

细菌生物膜的存在和细菌的高疏水性可医院环境定植和传播,细菌生物膜很难去除,因为他们增加了对洗涤剂、消毒剂的耐受。生物膜内的保护可能是促使病医院环境中存活的重要机制。在花岗岩表面没有观察到粘附,玻璃上只观察到少量粘附,这表明相比其他材质,花岗岩和玻璃更有利于减少细菌的粘附,医院环境中的家具或其他表面。

参考文献:M.N.Zarpellonetal.Survivalofvan







































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